间隙连接在低Ca2+浓度时开放，此时的细胞质处于静息状态；当Ca2+浓度升高时，间隙连接的通道逐步缩小，当Ca2+浓度达到10-5M时间，通道完全关闭。提高H+浓度，也就是将细胞质中pH值从7.0降低到6.8或更低，间隙连接的通道也会关闭。间隙连接除了受Ca2+和H+调节外，还受其他的因素调节。